氨基酸分析仪的色谱柱是什么填料的?寿命大概能有多久?能自己装填吗?
您好,我是德国曼默博尔公司的工程师。
氨基酸分析的色谱柱填料主要是苯乙烯-二乙烯苯聚合后磺化成的磺酸型强酸性阳离子交换树脂。
其实,色谱柱寿命主要看自己使用时候保护的怎么样:包括样品前处理是否规范,维护保养是否充分等。一般注意点使用的话,保证柱效的情况下,寿命能保证在1万-2万针左右,多的话也有可能,看你怎么用了。有的厂家会吹嘘能到6万针,简单计算下氨基酸分析一个样大概得1小时左右,除去维护时间,一天最多跑个20针,一年也就6000针左右,10年才能跑完6万针,到时候仪器报废没报废都不知道,别说色谱柱了。
色谱柱的装填是非常需要经验和技巧的活儿,而且装色谱柱得需要非常专业的色谱柱装柱机。比如装色谱柱的时候得用恒压泵装,一般实验室仪器都配置的是恒流泵,恒流泵装出来的柱子填料很容易就塌了。而且前期的填料清洗、匀浆等都非常需要经验,要是自己装估计很难,一般得找专业的色谱柱工程师装填最好。
希望对您有帮助,记得给分
氨基酸自动分析仪的色谱柱填装固定相是什么
不是。填料通常是指发挥支撑作用的硅胶,而且是多孔的硅胶。固定相正是硅胶所承担支撑的物质。在实现拆分过程中,发挥主要作用的是固定相,而填料也会对拆分产生一定的影响,但是在目前色谱拆分领域,填料的影响通常因为较弱会被忽略掉。
如果用英文表示,CPMs是指固定相和填料,称为手性填装材料,就是可以直接拿来装进柱子使用的。
CSPs是指固定相,需要通过涂覆、摔打的方式才能够和填料混合在一起,形成CPMs。
氨基酸的分离用什么色谱柱
如果是两个氨基酸的保留时间距离太近,那么只能调整液相条件了。比如调整流动相比例,或者是梯度比例,把两个氨基酸拉开。
也可以适当调整衍生程序。虽然衍生程序不会对氨基酸的保留时间有影响,不过会对它的信号产生影响。如果这两种氨基酸的峰高有所下降,或许分离度也可以达到要求。
还有就是注意峰型。衍生化程序很容易损坏色谱柱,超高效色谱的压力又高,色谱柱很容易损毁。如果峰型不好,建议用纯乙腈低流速反冲色谱柱。或者是更换新色谱柱。
有没有可以分析氨基酸的液相色谱柱
C18的短柱就可以。我用它分析过组氨酸、色氨酸、苏氨酸、酪氨酸和赖氨酸五种。
不过分析氨基酸重要的不是色谱柱,而是进样方式。
一般氨基酸的检测使用滴定法,因为它们没有紫外吸收。
所以,如果想要用液相检测,那么肯定要用到衍生。我当时用的是柱前衍生,简单地说就是让样品和衍生试剂、缓冲溶液等混合,然后形成有吸收的物质,然后再进样分析。
关于 色谱 氨基酸 出峰的问题
ODS柱是十八烷基硅烷键合硅胶填料(Octadecylsilyl,简称ODS),是一种常用的反相色谱柱,也叫C18柱;由于它是长链烷基键合相,有较高的碳含量和更好的疏水性,对各种类型的生物大分子有更强的适应能力,因此在生物化学分析工作中应用的最为广泛。
反相色谱中,溶质按其疏水性大小进行分离,极性越大疏水性越小的溶质,越不易与非极性的固定相结合,所以先被洗脱下来。
氨基酸的柱前衍生化:在碱性条件下,氨基酸的游离末端NH2与2,4—二硝基氟苯发生亲核芳环取代反应后,生成黄色的二硝基苯氨基酸(简称DNP-氨基酸)衍生物。
色谱图中各峰对应的氨基酸:a=Glu b=Arg, c=Ala, d=Phe 在c 之后。
参考:
ods柱
”氨基酸的分离与分析“实验教学设计
柱前衍生化_HPLC测定田参氨基酸胶囊中10种氨基酸的含量
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