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氨基酸自动分析仪测定蛋白质中氨基酸组成的原理?
采用经典的阳离子交换色谱分离、茚三酮柱后衍生法,对蛋白质水解液及各种游离氨基酸的组分含量进行分析。仪器基本结构同普通HPLC相似,但针对氨基酸分析进行了细节优化(例如氮气保护、惰性管路、在线脱气、洗脱梯度及柱温梯度控制等等)
通常细分为两种系统:蛋白水解分析系统(钠盐系统)和游离氨基酸分析系统(锂盐系统),利用不同浓度和pH值的柠檬酸钠或柠檬酸锂进行梯度洗脱。其中钠盐系统一次最多分析约25种氨基酸,速度较快,基线平直度好;锂盐系统一次最多分析约50种氨基酸,速度较慢,基线一般不如钠盐系统好。
分析效果:从目前已知的氨基酸分析方法比较来看,除灵敏度(即最低检测限)比HPLC柱前衍生方法稍低以外(HPLC:0.5pmol;氨基酸分析仪:10pmol),其他如分离度、重现性、操作简便性、运行成本等方面,都优于其他分析方法。
肥料化验都需要什么设备
我是一家肥料企业的化验员,现将我用到的和知道的仪器汇总如下,希望对你有所帮助,如果还是要其他什么类型的肥料化验设备,可以跟我说。
总氮含量的测定:蒸馏后滴定法(仲裁法)
设备:温度在400摄氏度以内可调的多孔消化仪
自动定氮仪
一般实验室仪器(三角瓶、烧杯、长颈漏斗、滴定管等等)
磷含量的测定:磷钼酸喹啉重量法
设备:恒温干燥箱,温度可控制在180摄氏度左右
玻璃坩埚式虑器
一般实验室仪器。
钾含量测定:四苯硼酸钾重量法
设备:恒温干燥箱,温度可控制在120摄氏度左右
玻璃坩埚式虑器,4号,容积为30mL
一般实验仪器
腐植酸含量测定:
设备:离心机,4000转每分,配有50mL聚四氟乙烯
恒温水浴锅,温度可达100摄氏度
一般实验仪器
游离氨基酸含量的测定:
设备:氨基酸自动分析仪
离心机10000转每分以上
蒸干装置,试管浓缩仪或其他浓缩设备
一般实验仪器
氨基酸自动检测仪和高速液相色谱仪有什么差别?具体的
氨基酸自动测定仪基本原理就是高效液相的原理,只是加了柱前衍生化功能,对氨基酸进行衍生化,以便检测器可以识别氨基酸。
全自动氨基酸分析仪的操作方法
测定样品中各种游离氨基酸含量,可以除去脂肪杂质后,直接上柱进行分析。
测定蛋白质的氨基酸组成时样品必须经酸水解,使蛋白质完全变成氨基酸后才上柱进行分析。 经过处理后的样品上柱进行分析。上柱的样品量根据所用自动分析仪的灵敏度来确定。一般为每种氨基酸0.1μmol 左右(水解样品干重为0.3mg 左右)。测定必须在pH5~5.5、100℃下进行,反应进行时间为10~15min,生成的紫色物质在570nm 波长下进行比色测定。而生成的黄色化合物在440nm 波长下进行比色测定。做一个氨基酸全分析一般只需1h 左右,同时可将几十个样品一起装入仪器,自动按序分析,最后自动计算给出精确的数据。仪器精确度在±1~3%。用阳离子交换柱分离及测定氨基酸所的如下图
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