今天跟大家伙儿聊聊我是咋测肥料里氨基酸含量的,这可是个技术活儿,不过跟着我一步步来,保准你能弄明白!
我也是两眼一抹黑,不知道从哪儿下手。后来我开始到处找资料,看那些农业标准,比如啥NY/T 1975-2010,里面提到几种测氨基酸的方法,有啥氨基酸自动分析仪法,还有柱前衍生-液相色谱仪法,听着就挺高大上的,对?
然后我又翻到别的资料,说还有茚三酮比色法、甲醛滴定法啥的。但是这些方法,要么就是结果不太准,要么就是步骤太多太麻烦,搞得我头都大。我还看到有人说用高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV),说是把肥料样品提一提就能测,感觉还挺方便。
我这人喜欢琢磨,就想试试不同的方法。我先搞点混合氨基酸标准液,这玩意儿仪器公司有卖的。然后又配1%的乙二胺四乙酸二钠溶液,也就是EDTA溶液。这些都是准备工作,得先弄
我就开始动手。我试试那个叫分光光度法的,说是先把样品处理一下,用活性炭吸一吸蛋白质,把颜色干扰去掉。然后再用EDTA把金属元素给弄掉,让氨基酸出来。这氨基酸跟茚三酮一反应,就变成蓝色。然后用分光光度计一测,就能知道氨基酸有多少。还得除以一个啥矫正系数,才能得到真正的游离氨基酸含量。
这中间的过程,可是费我不少劲儿。我得控制好各种条件,啥温度、时间,都得刚刚而且还得做空白对照,确保结果准确。有时候还得重复好几次,才能得到一个满意的结果。
后来我又试试那个高效液相色谱法(HPLC)。这个方法感觉更高级一些,可以把不同的氨基酸分开来测。不过这个方法对仪器要求比较高,我这儿的条件有限,就没深入研究。
- 实验材料准备
- 搞来混合氨基酸标准液(这玩意儿得找仪器公司买,他们有卖的)。
- 配好1%的乙二胺四乙酸二钠溶液,也就是那个啥EDTA溶液。
- 样品处理
- 先把样品处理一下,用活性炭把里面的蛋白质给吸走,顺便把那些影响颜色的东西也去掉。
- 再用EDTA把那些金属元素给络合,这样氨基酸就能释放出来。
- 显色反应
- 释放出来的氨基酸和茚三酮一反应,就会变成蓝色。
- 分光光度法测定
- 把变成蓝色的溶液放到分光光度计里头一测,就能知道氨基酸的量。
- 但是,测出来的结果还得除以一个矫正系数,才能得到真正的游离氨基酸含量。
- 实验过程中的各种坑
- 温度、时间啥的都得控制得刚刚差一点儿都不行。
- 还得做空白对照,这样才能保证结果是准的。
- 有时候还得重复好几次,才能得到一个满意的结果。
- 其他方法的尝试
- 还试试那个叫高效液相色谱法(HPLC)的,这个方法能把不同的氨基酸分开来测,听着就高级。
- 但是这个方法对仪器要求挺高的,咱这条件有限,就没深入搞。
测肥料里氨基酸含量,不是个简单的事儿。不同的方法有不同的优缺点,得根据实际情况来选择。我这儿只是分享我的一些经验,希望能给大家伙儿提供一些参考。
不过话说回来,这活儿虽然累,但是弄明白还是挺有成就感的。下次再遇到这种事儿,我就更有经验!
今天就跟大家聊这么多。希望我的这些分享能帮到你们!
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