今天来跟大家伙聊聊我是怎么测肥料里氨基酸含量的,这事儿可把我折腾得够呛,不过还是搞定,心里美滋滋的。
我是完全没头绪,不知道从哪儿下手。于是我就去网上各种搜资料,结果发现方法还真不少,有啥茚三酮比色法、甲醛滴定法,还有色谱法,看得我眼花缭乱。后来又听说啥高效液相色谱法(HPLC)跟液质联用法(LC-MS)挺准的,但是咱这小作坊哪有那高级设备,想想就头疼。
后来我翻到一个农业标准,叫什么NY/T 1975-2010,这里面提到氨基酸自动分析仪法和柱前衍生-液相色谱仪法。自动分析仪?听着就高大上,咱可买不起。柱前衍生-液相色谱仪法?这又是啥高级玩意儿,完全没概念。
然后,我又找到一个标准,T/XXX XXXX—XXXX,说的是用水溶肥料游离氨基酸含量的测定-分光光度法。分光光度法?这个听起来好像稍微靠谱点儿。我还听说有个高效液相色谱-紫外检测法(hplc-uv),可以将水溶性肥料样品进行提取。这个方法听上去也不错,但是我没有这个设备!
网上还说传统的游离氨基酸检测方法,什么化学法、生物法,操作起来麻烦得要死,还费时间,这年头谁还愿意用那些老掉牙的方法。不过又看到说分光光度法是利用氨基酸与衍生剂发生化学反应,产生蓝紫色化合物,这个化合物在某一个波长处有最大吸收峰。这个方法听着还可以,感觉咱能试试。
后来我继续查,看到一个原理,说是试样用磺基水杨酸沉淀蛋白质,然后用EDTA络合金属元素释放氨基酸,各种氨基酸经分离后分别与茚三酮显色。这都是啥,又是磺基水杨酸,又是EDTA,还茚三酮,听着都吓人。但是,这个茚三酮倒是引起我的注意,这不就是我之前看到的茚三酮比色法里面的那个茚三酮吗?
我决定,就用这个分光光度法试试!但我还是不放心,我又去搜搜,看到说水溶肥料中氨基酸含量的检测可以用分光光度法,要对样品进行预处理,然后通过活性炭吸附蛋白质和消除色素干扰。活性炭?这个我有,平时净水都用它。那就这么定!
实践记录如下:
第一步:准备工作
- 我找来咱常用的肥料样品,这可是咱的宝贝,不能浪费。
- 然后,我去仓库翻出之前买的活性炭,还好没过期。
- 我还找来实验室里常用的分光光度计,这可是个老古董,但是还能用。
- 其他的一些瓶瓶罐罐,烧杯、量筒啥的,也都准备好。
第二步:样品预处理
- 我按照网上的说法,先把肥料样品溶解在水里,然后加点活性炭进去。
- 然后,我就开始搅拌搅拌,搅半天,感觉差不多,就把溶液过滤一下。
第三步:显色反应
- 这一步,我可是小心翼翼的,生怕出错。我按照资料上说的,把过滤后的溶液跟茚三酮试剂混合在一起。
- 然后,我把混合后的溶液放到水浴锅里加热,说是要加热一段时间才能显色。
- 等一会儿,溶液真的变成蓝紫色,看着还挺神奇的。
第四步:测定
- 我把显色后的溶液放到分光光度计里,测一下它的吸光度。
- 然后,根据吸光度和标准曲线,计算出肥料里氨基酸的含量。
虽然过程挺曲折的,但是我总算是把肥料里氨基酸的含量测出来。这回实践也让我学到不少东西,以后再遇到类似的问题,我就有经验。这回尝试虽然磕磕绊绊,但结果还是好的,也算是一次成功的实践!
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