咱就来聊聊这个肥料总氨基酸测定方法,我可是自己亲手一步步试过来的,这过程,还真有点意思。我是找些资料看看,发现这个氨基酸测定,什么茚三酮比色法、甲醛滴定法,还有色谱法,五花八门的。但是,要么说是结果不太准,要么就是操作起来麻烦得很,还费时间,你说这哪行?
后来我就琢磨着,有没有啥简单点的方法?别急,还真让我找到!大概原理就是,先用磺基水杨酸把蛋白质给沉淀掉,再用EDTA把金属元素给络合,这样氨基酸就自己跑出来。然后,把这些氨基酸一个个分开,再和茚三酮一起,就会变成有颜色的东西,颜色的深浅就和氨基酸的多少有关系。
解这些,我就开始动手。我先是准备好各种试剂,然后就开始按步骤操作。每一步我都记得清清楚楚,生怕出点啥差错。
- 第一步,处理样品。我先用磺基水杨酸把肥料样品里的蛋白质给沉淀,这个过程得小心翼翼的,加多少量、怎么加,都有讲究。
- 第二步,释放氨基酸。沉淀完蛋白质,我就用EDTA去络合金属元素,这样氨基酸就被释放出来。这一步也很关键,EDTA的量要掌握少不行,多也不行。
- 第三步,分离氨基酸。氨基酸释放出来后,我还得把它们一个个分开,这样才能准确测定每一种氨基酸的含量。这一步我用的是离子交换色谱法,虽然听起来高大上,但实际上操作起来也挺费劲的。
- 第四步,显色反应。分离完氨基酸,我就让它们和茚三酮反应,生成有颜色的物质。这一步就比较直观,颜色越深,说明氨基酸含量越高。
- 一步,测量和计算。我用一个叫分光光度计的仪器,来测量这些有色物质的吸光度,然后根据一些公式,就能算出肥料里总氨基酸的含量。
整个过程下来,虽然有点复杂,但好在结果还不错。我测几次,数据都挺稳定的,看来这个方法还是挺靠谱的。而且我还发现,这种方法不仅可以测总氨基酸,还可以测每一种氨基酸的含量,真是太实用!
我还想说一句,做实验这事儿,还真得细心加耐心。有时候,一个小小的失误,就可能导致整个实验失败。每一步都得小心谨慎,这样才能得到准确可靠的结果。
今天的分享就到这里。希望我的经验能给大家带来一些帮助。记住,实践出真知,多动手试试,你也能成为这方面的高手!
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