肛门鉴别：雄性芦丁鸡泄殖腔有一生殖突起，而雌性芦丁鸡无生殖突起，平坦内凹。
羽色鉴别：满足“脖子处有一道月亮型围脖，胸口附近有蓝灰色羽毛，屁股附近有红棕色羽毛”中任意一条，一般则为雄性芦丁鸡。
行为鉴别：雄性芦丁鸡原地排便，打鸣时腮帮如同青蛙一般起起伏伏，而雌性芦丁排便时会倒退几步。
一、肛门鉴别法
在100万白炽灯光线下，左手握住芦丁鸡进行固定（头部朝下，背部紧贴于掌心），同时左手拇指、食指以及中指握住芦丁鸡身体，然后使用右手食指以及拇指将芦丁鸡泄殖腔附近的羽毛轻轻拨开，最后根据泄殖腔进行性别判断。其中雄性芦丁鸡泄殖腔黏膜呈黄色，下壁中央有一小的生殖突起，而雌性芦丁鸡泄殖腔黏膜呈淡黑色，无生殖突起，平坦内凹。
二、羽色鉴别法
1、如果是国产三色（原色、驼色、银色），雄性芦丁鸡的脖子处有一道月亮型围脖（脖颈处颜色分成三层，通常为白色-深色-白色），而雌性芦丁鸡通常没有。
2、如果胸口附近有蓝灰色羽毛，一般为雄性芦丁鸡。
3、如果屁股附近有红棕色羽毛，一般为雄性芦丁鸡，并且随着年龄增长，雄性激素越高，红色羽毛数量就越多。
4、如果是白色或瓦灰色芦丁鸡，凭借羽色不易进行区分，一般可以通过体型大小和尾巴进行区分，其中体型较大，尾巴向下的为雌性芦丁鸡，体型较小，尾巴水平的为雄性芦丁鸡。
三、行为鉴别法
1、雄性芦丁鸡打架会撩开翅膀呈圆弧形，而雌性芦丁鸡打架一般只会逃跑。
2、雄性芦丁鸡打鸣时，腮帮会像青蛙一样一起一伏，同时胸部低沉咕咕咕。
3、往食盆中放入面包虫，公鸡叼起来后不会立即进食，而是发出唧唧声呼唤母鸡前来进食，而母鸡只会闷头吃。
4、母鸡排便时，通常倒退几步，而公鸡原地排便。
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